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光譜流式細胞儀的調試和校準是怎么進(jìn)行的

更新時(shí)間:2022-06-26      點(diǎn)擊次數:1359
  光譜流式細胞術(shù)是一種基于常規流式細胞術(shù)的技術(shù),其中光譜儀和多通道檢測器代替了常規系統中的傳統反射鏡,濾光器和光電倍增管。流式細胞儀可以快速進(jìn)行多參數收集并分析單個(gè)細胞或顆粒上的數據。
  光譜流式細胞儀可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把細胞亞群從中分選出來(lái)。儀器采用激光作為激發(fā)光源,保證其具有更好的單色性與激發(fā)效率;利用熒光染料與單克隆抗體技術(shù)結合的標記技術(shù),保證檢測的靈敏度和特異性;用計算機系統對流動(dòng)的單細胞懸液中單個(gè)細胞的多個(gè)參數信號進(jìn)行數據處理分析,保證了檢測速度與統計分析精確性。
  光譜流式細胞儀的調試和校準是怎么進(jìn)行的:
  在使用前,甚至在使用過(guò)程中都要精心進(jìn)行調試,以保證工作的可靠性和佳性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區的光路等。
  激光強度:除調整反射鏡的角度以調整到所需波長(cháng)的激光出光外,還要結合顯示屏上的光譜曲線(xiàn)使激光的強度輸出為大。
  液流速度:可通過(guò)操作臺數字顯示監督,調節氣體壓力大小以獲得穩定的液流速度。
  測量區光路調節:這是調試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區的液流、激光束、90散射測量光電系統垂直正交,而且交點(diǎn)較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
  流式細胞術(shù)中所測得的量是相對值,因此需要在使用前或使用中對系統進(jìn)行校準或標定,這樣才能通過(guò)相對測量獲得的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能:儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩定,有形成份形狀應是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經(jīng)濟、容易獲得。
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