從原理上來(lái)講,3D光片顯微技術(shù)與傳統的寬場(chǎng)顯微技術(shù)或共聚焦顯微技術(shù)有很大不同,后兩者需要照射或掃描成像目標物中的整個(gè)樣本,而光片顯微鏡只需要用薄層光(實(shí)際上為2D)從側邊照射樣本。隨后從樣本的上部或下部檢測所產(chǎn)生的熒光信號,檢測方向與薄層光線(xiàn)的照射方向相垂直。因此,該技術(shù)的光學(xué)層析能力(optical sectioning,即層面上樣本結構的分辨能力)不像共聚焦成像技術(shù)那樣取決于焦點(diǎn)處光子的采集,而是來(lái)自于在開(kāi)始時(shí)每次僅激發(fā)一個(gè)層面上的熒光基團。換言之,光片顯微技術(shù)只會(huì )激發(fā)一個(gè)焦平面上或旁邊的分子,因此降低了光毒性,并且提高了長(cháng)時(shí)間對活體樣本進(jìn)行成像的能力。基于3D光片熒光顯微鏡本身的技術(shù)特點(diǎn),該系統滿(mǎn)足了快速、大體積3D成像、低光毒性及長(cháng)時(shí)間成像的需要。
應用領(lǐng)域:
1.3D高分辨率、高速實(shí)時(shí)成像:透明化樣本3D成像、熒光標記的活體樣本的結構特性、微弱熒光信號的高速3D成像。
2.模式動(dòng)物整體3D成像:果蠅,斑馬魚(yú),線(xiàn)蟲(chóng)等。
3.細胞動(dòng)態(tài)過(guò)程的快速成像,例如:細胞遷移、血流、血管發(fā)育、Ca2+成像。
4.動(dòng)物器官3D成像:心臟、腦、眼、耳等器官發(fā)育。
5.海洋生物熒光成像:海鞘、魷魚(yú)、浮游生物及扁形蟲(chóng)。
6.3D細胞長(cháng)時(shí)程培養實(shí)時(shí)成像。
7.形態(tài)和發(fā)育生物學(xué)研究:胚胎成像。
8.植物生物學(xué)研究:觀(guān)察敏感的發(fā)育過(guò)程和執行生理測量。
9.藥物藥理毒理及藥代動(dòng)力學(xué)研究。